Ensayo de inhibición

Ensayo de inhibición


Ensayo: Inhibición de semillas de lechuga


Inicio: 09/11/2012 - 16:30 hs.


Finalización: 14/11/2012 - 18 hs.


Objetivo: Determinar la CI50 y la CE50 del sulfato de cinc en semillas de lechuga.


Materiales
 
- Agua destilada
- Cajas de petri (6)
- Hoja milimetrada
- Lupa
- Pinza
- Pizeta
- Semillas de lactuca sativa (lechuga)
- Sulfato de cinc


Fundamento teórico

Una semilla contiene en su interior el embrión que es el esbozo de la futura planta. Ese embrión se mantiene con vida durante un lapso variable según la especie de planta, que varia desde unos pocos días hasta 200 años como máximo.
El embrión permanece en un estado latente, y en este estado el consumo de oxígeno y de alimento es reducido al mínimo. La semilla ha germinado cuando este embrión latente reanuda su crecimiento rápido. Este pasaje a crecimiento rápido y activo es favorecido por factores como el agua, oxígeno y una temperatura determinada.
Lactuca sativa, la lechuga, es una planta propia de las regiones semi-templadas, que se cultiva con fines alimentarios. Debido a las muchas variedades que existen, y a su cultivo cada vez mayor en invernaderos, se puede consumir durante todo el año.
La lechuga soporta peor las temperaturas elevadas que las bajas. Como temperatura máxima tendría los 30 °C y como mínima puede soportar hasta –6 °C.
Para su cultivo, la humedad relativa conveniente es del 60 al 80%. Prefiere suelos ligeros, arenoso-limosos y con buen drenaje. El pH óptimo se sitúa entre 6,7 y 7,4.
Esta planta es muy exigente en potasio y al consumir más potasio va a absorber más magnesio, por lo que es necesario equilibrar esta posible carencia al abonar el cultivo. También es muy exigente en molibdeno durante la primera etapa del desarrollo.


El poder germinativo de la semilla es la relación entre la cantidad de semillas germinadas y la cantidad de semillas analizadas a una temperatura de 24°C con humedad suficiente.

Como resultado del ensayo anterior, 49 de las 50 semillas en estudio germinaron.

Es decir: 

 

Lo que verifica que las semillas poseen un muy buen poder germinativo.


La toxicología es el estudio de los efectos nocivos sobre organismos de sustancias que son ajenas a ellos. Los tóxicos son los xenobióticos que producen efectos adversos en los organismos vivos. La toxicología ambiental estudia los daños causados al organismo por la exposición crónica a los tóxicos que se encuentran en el medio ambiente. En la vista de las consideraciones prácticas como el coste y el tiempo, la mayoría de los experimentos involucran el desarrollo de episodios de toxicidad aguda en lugar de crónica.
La dosis de sustancia administrada en ensayos toxicológicos se expresa en miligramos por unidad de masa del animal sobre el que se realiza el ensayo, usualmente expresada en kilogramos. Es necesario referir la dosis por la masa del cuerpo, porque la toxicidad de una cantidad determinada de sustancia disminuye a medida que crece el tamaño del individuo. Normalmente la toxicidad de una sustancia aumenta al aumentar la dosis.
Los científicos han creado las relaciones dosis-respuesta para sustancia tóxicas, incluyendo los agentes ambientales.
La concentración inhibitoria 50 (CI50)es aquella concentración que inhibe el crecimiento de radícula, en la germinación de la semilla, de la mitad de la muestra. Por su parte, la concentración efectiva 50 (CE50) es la concentración que inhibe la germinación de las mitad de las semillas en estudio.


Procedimiento

1. Se seleccionan 60 semillas de lechuga.
2. Se preparan soluciones de sulfato de cinc de diferentes concentraciones:
- 250 ml solución 0.1 M
- 250 ml solución 0.01 M
- 250 ml solución 0.001 M
- 250 ml solución 0.0001 M
- 250 ml solución 0.00001 M
3. Se cortan círculos de papeles de filtro del diámetro de las cajas de petri, y se las colocan dentro de estas.

4. Se humedecen los papeles de filtro con 5 ml de las soluciones preparadas, una solución por cada caja de petri. Una de las cajas de petri se la humedece con 5 ml de agua destilada, para verificar como testigo.
5. Se rotulan las cajas, y se las guarda en una caja cerrada en la oscuridad.6. Luego de 3 días se observan las cajas, para verificar la germinación de las semillas.

7. Al quinto día, se extrae cada semilla germinada y se mide el tamaño de la radícula con la ayuda de un papel milimetrado.


Resultados obtenidos

Una vez medidos los diámetros de las raíces, se obtuvieron los siguientes resultados:

 

Milímetros de la raíz
Concentración	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
TESTIGO
0,1 M	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0
0,01 M	4	3	4	3	4	3	4	4	4	3
0,001 M	10	8	10	8	12	11	15	18	2	5
0,0001 M	18	32	28	24	24	34	35	27	31
0,00001 M	29	25	21	24	21	31	19	26

 

Como resultado, se puede obtener un promedio de las medidas obtenidas para cada una de las concentraciones analizadas. Los promedios son:
Concentración 0,1 M: No hubo germinación
Concentración 0,01 M: 3,6 mm
Concentración 0,001 M: 9,9 mm
Concentración 0,0001 M: 25,3 mm
Concentración 0,00001 M: 19,6 mm


Conclusión

 

Podemos concluir, que la solución más concentrada de sulfato de cinc (0,1 M) inhibió completamente la germinación de las semillas. Además, a medida la concentración de las soluciones utilizadas disminuye, se verifica que la longitud de la raíz aumenta.



Bibliografía

- Zarzur, Pedro. Biología 1. Escuelas de educación técnica. Editorial Plus Ultra. Cuarta edición. 1981.

- http://www.abulac.es/articulo%204.htm
- http://www2.ine.gob.mx/publicaciones/libros/573/cap4.pdf